КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер 14-36-00023

НазваниеИсследование по проблемам агроэкологии техногенных наноматериалов, обеспечивающих улучшение условий жизни и среды обитания человека

РуководительСизова Елена Анатольевна, Доктор биологических наук

Организация финансирования, регион Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук", Оренбургская обл

Период выполнения при поддержке РНФ 2014 г. - 2016 г. 

Конкурс№3 - Конкурс 2014 года «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований вновь создаваемыми научной организацией и вузом совместными научными лабораториями».

Область знания, основной код классификатора 06 - Сельскохозяйственные науки, 06-204 - Животноводство

Ключевые словананотоксикология, агробиоценозы, техногенные наноматериалы, среда обитания, агроэкология, экосистема.

Код ГРНТИ68.03.00


СтатусУспешно завершен


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Разработка и использование наноматериалов является одним из интригующих направлений развития науки и техники в ХХI веке. К настоящему времени в мире уже зарегистрировано и выпускается более 4000 наименований наноматериалов (т.е. структур в диапазоне размеров до 100 нанометров). При этом дальнейший прогресс в их производстве и применении неизбежно приведет к массовому поступлению наноматериалов в природные экосистемы и среду обитания человека. Подобная ситуация предъявляет ранее не существовавший, но становящийся все более актуальным заказ на исследование возможных последствий действия наноматериалов на условия жизни и среду обитания человека. Первые научные работы, описывающие выраженное токсическое действие «биологически» инертных веществ в наноформе определили появление новой научной дисциплины нанотоксикология. Количество научных работ по данному направлению, индексированных в информационных ресурсах, за последние 5 лет увеличилось более чем в 10 раз. Актуальность для общества вопросов воздействия наноматериалов на среду обитания человека, подтверждается образованием в 2008 году Международного нанотоксикологического альянса (International Alliance for NanoENS Harmonization, IANH), а также появлением в 2010-2013 года новых регламентирующих и методических документов Роспотребнадзора по проблеме. Предполагаемый проект направлен на исследование путей миграции и ассимиляции техногенных наноматериалов в агроэкосистемах, оценку их влияния на высшие растения и животных, разработку методов повышения продуктивности агробиоценозов с использованием наноматериалов, выработку предложений по снижению техногенной нагрузки наноматериалов на среду с целью улучшения условий жизни и среды обитания человека. Проектом предполагается создание совместной лаборатории «Агроэкология техногенных наноматериалов» на базе Оренбургского государственного университета и ВНИИ мясного скотоводства. План исследований включает комплексные работы по оценке не менее 30 наименований техногенных наноматериалов (структур в диапазоне размеров до 100 нм), имеющих наиболее широкое использование в промышленности и сельском хозяйстве, в т.ч. углеродные наноматериалы; металлы для порошковой металлургии, ракетного топлива и др. способные оказать влияние на среду обитания человека Исследования на модели агробиоценозов будут включать экспериментальные работы по биологической и др. оценке среды обитания (почва, грунт, вода искусственных и естественных аквасистем); микрофлоры, беспозвоночных животных; растительных объектов, сельскохозяйственных и лабораторных животных в условиях поступления техногенных наноматериалов в экосистемы, на искусственно созданных и естественных моделях. Будут исследованы особенности формирования сукцессий микро- и мезофауны при нагрузке техногенными наноматериалами. Предполагаются исследования по оценке техногенных наноматериалов на диструкцию растительных остатков при вермикомпостировании с использованием модели калифорнийского красного дождевого червя (Eisenia foetiola). Исследования на растительных объектах будут включать экспериментальные работы по оценке роста и развития, приспособления растений-сельскохозяйственных культур (Triticuma estivum L., Allium сера L. и др.) к условиям среды обитания, включающим наноматериалы техногенного происхождения. Исследования по оценке непосредственного и опосредованного через трофические цепи влияния техногенных наноматериалов на животных (лабораторных – крысы, мыши, сельскохозяйственных – карп, куры) будут включать эксперименты по оценке продуктивности, физиолого-биохимических характеристик, изучения морфофункциональных особенностей тканей и систем организма, этологии, воспроизводство животных и др. Продукция растениеводства и животноводства будет оценена в соответствии с существующими санитарными нормами. Будет проведена аттестация техногенных наноматериалов методами электронной, атомно-силовой микроскопии, рентгеноструктурного анализа, атомно-эмиссионной и масс-спектроскопии, другими физико-химическими методами. Будет проведена оценка биологической активности опытных наноматериалов при реализации теста ингибирования бактериальной биолюминесценции генно-инженерных люминесцирующих штаммов Escherichia coli k12 TG1, конститутивно экспрессирующих lux CDABE- Photobacterium leiongnathi 54D10, а также на модели инфузорий. По итогам исследований будет подготовлены не менее 27 публикаций в т.ч. 15 в изданиях индексируемых Web of Science или Scopus, 7 патентов на изобретения.

Ожидаемые результаты
Ограниченные знания о биологических эффектах веществ в наноформе и бурный рост нанотехнологий в принципе, определяют значимость поисковых работ по агроэкологии техногенных наноматериалов. В этой связи наряду с исследованиями по оценке биотоксичности наноматериалов на отдельных биологических объектах, все больше значение приобретают комплексные работы по изучению влияния наноматериалов на экосистемы и среду обитания человека. Этой цели и посвящены предполагаемые исследования, обеспечивающие получение следующих результатов. Материалы комплексных исследований более чем 30 техногенных наноматериалов, по физико-химическим свойствам: биологической активности, по тесту биолюминесценции генно-инженерных штаммов; биотоксичности; действию на полевые и аквабиоценозы; непосредственно и опосредованно на сельскохозяйственные растения (Triticuma estivum L., Allium сера L. и др.), животных (лабораторные - крысы, мыши, сельскохозяйственные - куры, карп), качество продукции сельского хозяйства. В конечном итоге проведенные исследования будут способствовать улучшению условий жизни и среды обитания человека. При проведении исследований на модели полевых агробиоценозов будут получены данные о влиянии техногенных наночастиц на общую биологическую активность почв в т.ч. по интенсивности разложения целлюлозы; почвенные грибные сообщества; характеристики беспозвоночных (численность, плотность, видовой состав, развитие и т.д.). В исследованиях по влиянию техногенных наноматериалов на процессы вермикомпостирования будут получены новые данные по адаптационным возможностям Eisenie foetiola, изучены характеристики вермикомпоста в т.ч. численность и характеристики микроорганизмов различных эколого-трофических групп и т.д. Будут получены новые данные по влиянию техногенных наноматериалов на поведение животных, их воспроизводительную способность, характеристики обмена веществ, выявление наноматериалов, являющиеся ингибиторами и/или индукторами апоптоза. Будут получены данные о путях миграции и ассимиляции техногенных наноматериалов в агроэкосистемах, предложены методы их биодиструкции. Будут разработаны: методика агроэкологического исследования воздействия техногенных наноматериалов на окружающую среду; рекомендации по комплексу мер, обеспечивающих снижение техногенной нагрузки агроэкосистем наноматериалами и улучшений условий жизни и среды обитания человека; методика оценки биобезопасности наноматериалов. Приоритет исследований предполагается защитить не менее чем 7 патентами на изобретение в т.ч.: метод повышения продуктивности сельскохозяйственной птицы, основанный на новых решениях по использованию наночастиц металлов-микроэлементов; метод биодиструкции техногенных наноматериалов и т.д. Важным результатом выполнения проекта станет создание и оснащение современным оборудованием лаборатории «Агроэкология техногенных наноматериалов». По итогам исследований будет подготовлены не менее 27 публикаций в т.ч. 15 в изданиях индексируемых Web of Science или Scopus.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


Аннотация результатов, полученных в 2014 году
Регламент патентного поиска выполнен полностью. В ходе исследований сформированы базы данных по физико-химической аттестации 30 наноматериалов: Cu (I, II), Mo, W, Cr2O3, CuO, MoO3, NiO, SiO2 (I, II), TiO2 (I, II),, ZnO (I, II), Fe (I, II), Ti, Al, Ag (I, II), Al2O3, Ni, CuZn (сплав), Cu-Zn (смесь наночастиц), Fe3O4 (I, II), FeCo (сплав), Fe-Co (смесь наночастиц), CeO2, ОСУНТ, включающие размер частиц, полидисперсность, объемность, количественное содержание фракций, площадь поверхности, химический состав (примечание: Cu (I) – d 55 нм; Cu (II) – d 97 нм, SiO2 (I) - d 30 нм; SiO2 (II) - d 40,9 нм; TiO2 (I) – d 90 нм; TiO2 (II) - 23,8 нм; ZnO (I) - 95 нм; ZnO (II) – 49,9 нм; Fe (I) – 90 нм; Fe (II) – 65 нм, Ag (I) – 70 нм, способ получения - газофазный; Ag (II) – 7,2 нм, способ получения - химический; Fe3O4 (I) – 80 нм, способ получения - газофазный; Fe3O4 (II) -65 нм, способ получения – химический, Al – в пальмитиновой кислоте d -80 нм). Экспериментальные исследования включали 120 экспериментов на моделях Escherichia coli k12 TG1(+ lux CDABE), Paramecium caudatum, Stylonychia mytilus, Danio Rerio и Triticum aestivum по оценки биотоксичности наноматериалов, 2 эксперимента на сельскохозяйственных животных. По итогам работ подготовлено 7 публикаций, 3 статьи опубликованы в журналах базы РИНЦ, 1 статья принята к публикации в журнале базы Web of Science. Оценка активности наноматериалов проведена на модели генно-инженерного люминесцирующего штамма Echerichia coli K12 TG1, конститутивно экспрессирующего luxCDABE-гены природного морского микроорганизма Photobacterium leiongnathi 54D10 (определение ЕС50 для точек измерения: 60, 120 и 180 мин), диапазон концентраций - 100-10-6. В эксперименте наночастицы Zn и Ag (II) характеризовались наибольшей токсичностью среди оцениваемых препаратов элементарных металлов. Наночастицы Zn являлись более токсичными, вызывая 100 % подавление свечения после 10 мин контакта, аналогичный эффект для наночастиц Ag (II) отмечался после 30 мин. Наиболее токсичными из исследуемых оксидов являлись ZnO (I) и ZnO (II), вызывающие 100 % подавление свечения бактерий в диапазоне концентраций более 0,00001 моль/л. В рамках исследований по оценке биотоксичности наночастиц перспективных для формирования адгезивных поверхностей выявлен факт меньшей токсичности препарата сплава цинка и меди в отличие от смеси этих элементарных металлов. Для модели Escherichia coli k12 TG1(+ lux CDABE) ряд токсичности был представлен следующей последовательностью: Zn > ZnO (II) > ZnO (I)> CuZn (смесь) > Ag (II) > CuZn (сплав) >MoO3 > Ni >Ag (I) > Mo > Cu(II) > FeCo >NiO (I) >Cu (I) > W > CuO > Fe (I)>Fe3O4≥ Fe3O4 (II) > Fe (II) > Al в пальм > Ti > TiO2 (II) > Cr2O3 > TiO2 (I) > SiO2 (II) > CeO2 = Al2O3 = SiO2 (I). Оценка биотоксичности на модели культуры Раramecium caudatum Ehrenberg и Stylonychia mytilus (исследуемые тест-функции: выживаемость, численность, хемотаксис; диапазон концентраций наноматериалов - 10-0-10-6 моль/л; временные периоды оценки: 10 мин, 1, 6, 12 и 24 часа) позволила сформировать следующий ряд токсичности опытных наноматериалов: Cu-Zn (смесь)> Ag (II) = Ag (I) > CuZn (сплав) > Cu (I) = Cu (II) > CuO = Zn > Mo = MoO3 > Al2O3 >Ni = NiO > ZnO (I) =ZnO (II) > W > Fe (I) = Fe (II) = Fe3O4 (I) = Fe3O4(II) = FeCo (сплав) = Ti = TiO2 (I) = TiO2 (II) = Al = SiO2 (I) = SiO2 (II) = Cr2O3 = CeO2. В линейке препаратов элементарных металлов наиболее токсичными оказались Cu, Fe, Ag. Во всех исследуемых концентрациях наблюдалась 100% гибель клеток, причем, если у Fe токсичность проявлялась только через 24 часа, то у Cu и Ag эффект наступал уже через 10 минут инкубации. Наночастицы Zn менее токсичны, 100% гибель отмечалась при концентрации более 0,003125 М, с уменьшением концентрации элемента, количество живых клеток увеличивалось, и достигло 21% от общего количества в концентрации 2*10-4моль/л. Токсичность наночастиц Mo и W была менее выраженной и наблюдалась при концентрации 0,025 и 0,1 М. Токсический эффект для препаратов наночастиц Zn, Ti, Al, Ni обнаружен не был. Закономерно, токсичность сплава элементарных металлов Cu и Zn, была ниже, чем у их смеси. Во всех концентрациях была зафиксирована 100% гибель клеток. В сравнении с данной смесью латунь характеризовалась меньшим токсическим действием, полная гибель инфузорий наблюдалась до концентрации 0,0015625 М, эффект проявился через 10 минут инкубации. Меньшей токсичностью обладала смесь FeCo, полная гибель клеток наблюдалась через 24 часа до концентрации 0,05М, при меньших концентрациях токсического эффекта выявлено не было. В ходе исследований сформированы базы данных по оценке роста и развития, приспособления растений Triticum aestivum и Allium cepa к условиям среды обитания, включающей наноматериалы. В тесте на всхожесть зёрен Triticum aestivum сформирован ряд токсичности: MoO3 ≥ W > TiO2 (II) = Ag (II) = Ag (I) = NiO (I) = Mo > Zn = TiO2 (I) > Ti = Ni = Cr2O3 = ZnO (II) > CeO2 = Cu-Zn (смесь) = Cu (II) > CuO > ZnO (I) > Cu = CuZn (сплав) = Fe (II) > Fe3O4 (I) = FeCo (смесь) = Fe (I) = Fe3O4 (II) = Al2O3 = SiO2 (II) = SiO2 (I). Наиболее выраженным токсическим действием характеризовались наночастицы MoO3 в концентрациях более 2*10-4 моль/л. Оценка механизмов приспособления растений пшеницы мягкой и лука репчатого к условиям среды обитания, содержащей наночастицы меди, выявила более чем двукратное до 684±120 нм утолщение клеточных стенок в корнях. Ультраструктурные изменения клеточных стенок корня выражались появлением многочисленных плазмодерм, что может быть следствием прохождения через них наночастиц. Электронно-микроскопическими исследованиями в цитоплазме клеток обнаружено скопление электронно-плотных образований сходных по характеристикам с наночастицами. Присутствие наночастиц меди в среде культивирования ведет к повреждению (фрагментации) ДНК в клетках корня растений. Итоговым механизмом действия наночастиц меди в отношении модельных растений является (подавление размножения клеток меристемы корня до вхождения в митоз), а его внешним выражением – фитотоксический эффект, заключающийся в подавлении роста корней растений. Присутствие наночастиц железа в среде культивирования ведет к накоплению данного металла в тканях растений и в определенном диапазоне концентраций сопровождается развитием ростстимулирующего эффекта. В ходе исследований сформированы базы данных по оценке влияния техногенных наноматериалов на биоценозы искусственных аквасистем, созданных с использованием лабораторных монокультур одноклеточных зеленых водорослей (S.quadricauda и Сhl.Vulgaris); ряски малой (Lemna minor L.), элодеи (Elodea Canadensis Rich); инфузорий (Paramecium candatum Ehr.); рачков (Daphnia magna Straus); моллюсков (Limnea stagnalis) и рыб (Danio rerio). Полученный материал включает результаты токсикологических исследований на модели Danio Rerio с экспозициях в лиозолях оцениваемых наночастиц (10-0-10-6моль/л). Из всей оцениваемой линейки препаратов в эксперименте констатирован только один случай гибели рыбы (20%) при использовании наночастиц диоксида титана. В ходе исследований на сельскохозяйственных животных дана оценка перспективности препаратов микроэлементов на основе наночастиц сплава антагонистов. Это решение является альтернативой практики раздельного включения в рацион веществ антагонистов, в частности у детей первого года жизни раздельное применение препаратов железа и цинка; при использовании витаминно-минеральных препаратов аналогов «Алфафита» и др. На модели карпа и цыплят-бройлеров дана оценка препарату наночастиц сплава Fe и Co (d=62,5±0,6 нм) в сравнении с традиционными минеральными источниками этих элементов сульфатами и хлоридами. Использование наночастиц сплава элемента сопровождалось достоверным повышением интенсивности роста цыплят-бройлеров на 7,9% (р<0,001), годовиков карпа на 9,1 % (р<0,001). В этом случае биодоступность железа и кобальта повышается на 16,3 и 3,1% соответственно. Использование сплава в форме ультрадисперсных порошков не оказало негативного влияния на ретенцию антагонистов железа и кобальта, интегральный пул 14 эссенциальных и условно-эссенциальных элементов увеличился. В тоже время использование препарата наночастиц сплава железа и кобальта сопровождалось увеличением пула кадмия и алюминия, но в пределах физиологической нормы. По итогам исследований поданы три заявки на получение патента РФ: «Метод повышения продуктивности цыплят-бройлеров», «Корм для сельскохозяйственной птицы», «Способ повышения урожайности сельскохозяйственных культур».

 

Публикации

1. Дерябина Т.Д., Грязева И.В., Ефремова Л.В., Косян Д.Б., Кульсарин А.А. Анализ механизмов биологической активности наночастиц меди в тестах на Triticulum Aestivum Allium Сepa Технологии живых систем, №5, том 11, с. 17-26. (год публикации - 2014)

2. Дерябина Т.Д., Сизова Е.А. Особенности роста и развития Triticum aestivum при культивировании в среде содержащей ионы, нано- и микрочастицы железа Перспективы науки, №11(62), 18-23 (год публикации - 2014)

3. Е.П. Мирошникова, А.Е. Аринжанов, Ю.В. Килякова, Е.А. Сизова, С.А. Мирошников Antagonist Metal Alloy Nanoparticles of Iron and Cobalt: Impact on Trace Element Metabolism in Carp and Chicken HVM Bioflux, Vol. 7, Issue 4 (год публикации - 2015)

4. Нестеров Д.В., Сипайлова О.Ю., Сизова Е.А., Шейда Е.В. Сравнительная оценка влияния различных способов введения наночастиц меди на обмен токсичных элементов в мышечной ткани цыплят-бройлеров Актуальные проблемы транспортной медицины, №3 (37), с. 146-149 (год публикации - 2014)


Аннотация результатов, полученных в 2015 году
В 2015 году выполнено более 500 экспериментов: в т. ч на моделях сельскохозяйственных культур (Triticuma estivum L., Allium сера L.) - 180, Eisenia foetida – 60, искусственных аквабиоценозов – 90, крыс Wistar – 60; простейших – 90, модельных микроорганизмах – 90. По итогам работ подготовлено 19 статей, в т. ч. 12 для публикации в журналах, входящих в БД Scopus и WoS. В ходе исследований сформированы базы данных, включающие результаты исследований молекулярных и клеточных механизмов действия наночастиц (0,025-0,1 М) на окислительное повреждение ДНК Triticum aestivum L. и Allium cepa L. По степени развития ДНК-повреждающего эффекта наноматериалы выделены в группы: I –сильнотоксичные (Cu:Zn, Cu (d=97 нм), Zn, Ni, Ti, МоО3, TiO2 (d=90 нм), латунь, ZnО (d=95 нм), NiO, Мо, Cu(d=55 нм), Ag (70 нм), Ag (d=7,2)), II – среднетоксичные (Al, TiO2 (d=59.6 нм), Cr2O3, CuО, Al2O3, CeO2), III – слаботоксичные (Fe, Fe3О4, Fe+Со, NiO, ОСУНТ, ZnО (d=49.9 нм), W, SiO2 (d=30, 40.9 нм), МоО3, IV – не токсичные (Fe3О4 (d=65). В экспериментах выявлена более высокая токсичность НЧ металлов в сравнении с их оксидами, смеси меди с цинком, в сравнении с наноматериалами указанных элементов. Показано, что приспособление Triticum aestivum L. и Allium cepa L. к присутствию в среде культивирования НЧ в первую очередь проявляется в изменении корневой системы растений. При этом наиболее выраженные патологии развивались под влиянием «токсической линейки» Cu, Zn, CuZn, Al, Ni, Mo, MoO3, W, Cr2O3 (0,19-100 ммоль/л) и выражались в нарушении роста первичного корня, увеличении количества боковых корней, рост которых также был существенно подавлен. Культивирование Triticum aestivum L. с НЧ Ag (70 нм), Fe в концентрации (6,25 ммоль/л) стимулирует всхожесть семян, прирост биомассы корней и надземной части проростков на 5-10%, увеличивается скорость роста. Показана способность наночастиц к биоаккумуляции растениями. С учётом совокупности морфологических показателей сформирован ряд токсичности наночастиц по отношению к Allium cepa L., Triticum aestivum L. В эксперименте выявлен факт снижения плодовитости самок Wistar на 36 % при парентеральном введение НЧ Cu (15,6 ммоль/кг). Оценка развития плодов при дозовых нагрузках (7,8 – 15,6 ммоль/кг) не выявила эмбриональной и постэмбриональной смертности, видимых пороков развития, все плоды имели правильно сформированные отделы тела, достоверно не отличались по массе от контроля. Установлены изменения морфометрических параметров плацент: уменьшение, диаметра и площади материнской поверхности плаценты. При этом не выявлены различия в толщине плацентарной ткани. Установлено снижение плацентарно-плодового коэффициента на 18% (р≤0,001) в опытных группах. Более высокие дозировки НЧ Cu (195 ммоль/кг), CuO (470 ммоль/кг) приводили к абортам. Аналогичные результаты получены при введении НЧ Zn, ZnO. На основе обработки экспериментальных данных сформирован ряд токсичности НЧ по показателям смертности E. foetida: CuO (80%)>MoO3 (73%)>Zn (70%)> Mo (50%)>Al2O3 (20%)>ZnO (20%)>Сu (20%)>Al (10%)>W (5%). Адаптационно-приспособительные реакции E. foetida проявлялись в стремлении к эвакуации из субстрата, создании демаркационного слизистого барьера. Выявлены пороговые дозировки, оказывающие депрессирущиее влияние на рост червей: Сu (7,86 ммоль/кг), Mo (5,2 ммоль/кг), Al (111,0 ммоль/кг), CuO (6,5 ммоль/кг), MoO3 (3,47 ммоль/кг), Al2O3 (1,02 ммоль/кг), Zn (7,64 ммоль/кг), ZnO (6,21 ммоль/кг), W (0,16 ммоль/кг). В экспериментах описано стимулирующее влияние наночастиц на развитие Eisenia fоetida (Zn 0,76 ммоль/кг; MoO3 0,069-0,27 ммоль/кг). Исследования микроэкологического статуса E. foetida с использованием метода T-RFLP позволили выявить снижение видового разнообразия грамположительной микрофлоры и увеличение числа грамотрицательных бактерий, с увеличением бактерий таксона Proteobacteria на 51,7 %, снижением числа бактерий, относящихся к таксону Firmicutes и Actinobacteria на 41,6 и 4,4 % соответственно. Наблюдалось снижение численности таких таксонов как Clostridium (- 39,1 %), Nitrobacter (-3,26 %) и Pseudomonas (-6,2%), являющихся основными представителями микрофлоры кишечника Eisenia fetida контрольной группы, и увеличение численности р. Verminephrobacter (+ 46 %) и р. Ochrobactrum (+ 19,5 %). При оценке микробных сообществ почв на фоне внесения НЧ показан микотоксический эффект. В зависимости от вида и дозировки наночастиц значения КОЕ грибов и аммонифицирующих микроорганизмов снижалось. На фоне депрессирующего влияния на целлюлозолитические бактерии при концентрациях наночастиц выше 7 ммоль/кг, зафиксирован стимулирующий эффект Нч Zn и MoO3 при концентрациях 0,76 и 0,27 ммоль/кг. Увеличение концентрации НЧ до 500 мг/кг вызывало угнетение микробиологических процессов и ферментативных реакций Токсическое действие НЧ на моделях искусственных аквасистем сопровождалось 100% гибелью Danio rerio после 40 суток экспозиции (NiO, СuO, CeO2), и снижении их выживаемости, (Cu, MoO3, NiO, CeO2, Fe, Fe3O4, Zn, ZnO, CuZn (сплав) и CuZn (смесь)); 100 % гибель Limnea stagnalis была зафиксирована при использовании НЧ NiO, Fe и Fe3O4. Присутствие в среде обитания Lemna minor наночастиц CeO2, MoO3, Fe, Fe3O4, CuZn (сплав) и CuZn (смесь) сопровождалось изменением окраски, хлороз (пожелтение) и разъединение листецов. Установлен дозозависимый токсический эффект по интенсификации ПОЛ для Danio rerio с НЧ: Cu(I), СuO, MoO3, Mo, SiO2, Zn, CuZn (сплав), CuZn (смесь), Ti, TiО2(I), Ag(II), W, Cr2O3,ОСУНТ; для Limnea stagnalis: CeO2, SiO2(II), Fe(I), Fe3O4(I), ZnO(I), CuZn (сплав), CuZn (смесь), Ti, TiО2(I), Ag(II), W, Cr2O3,ОСУНТ на фоне снижения активности каталазы и супероксиддисмутазы. По совокупности оцениваемых показателей сформированы ряды токсичности НЧ для Danio rerio: Fe3O4 (d=65)>Fe>CeO2>NiO>СuO>Cu(d=55нм)>MoO3>SiO2(d=30нм)>Ni>Cr2O3>Mo>Zn>ZnO(d=95нм)>Ti=TiО2(d=90нм)>W>Ag(d=7,2нм)>ОСУНТ>CuZn(сплав)=CuZn(смесь); Limnea stagnalis: Fe3O4(d=65нм)=Fe>NiO>Mo>MoO3>Ni>CuZn(сплав)=CuZn(смесь)>Zn=ZnO(95нм)>W>Cu(55нм)>Cr2O3>SiO2(40,9нм)=CeO2>Ag(d=7,2)>Ti=TiО2(d=90нм)>ОСУНТ>СuO. Выраженная кумуляция химических элементов была характерна для Limnea stagnalis. В частности при введении в среду НЧ NiО, Ni концентрация никеля в теле возрастала в 8,6 раз и в 14,9 раз соответственно по сравнению с контролем. В эксперименте выявлены НЧ (Ti, TiO2, W, ZnO), оказывающие стимулирующее действие на показатели двигательной активности крыс Wistar. Протестированные в ходе экспериментов НЧ по выраженности нейротропного эффекта были распределены по группам: депрессиирующие двигательную активность – MoO3 Mo, CuO, Cu (55; 97 нм), Fe (80, 90 нм), Fe2O3; НЧ, вызывающие гиперактивность, возбуждение - TiO2 (23.8, 90 нм), W, Zn, ZnO; инертные к этологическим параметрам – ZnO, MoO3 W, Ti. В эксперименте показан нейротоксический эффект для НЧ. Изменения морфофункциональных характеристик тканей головного мозга крыс сочетались с изменениями в элементном составе. Концентрация вводимого металла в головном мозге, как правило, увеличивалась уже в первые сутки. При этом значительные колебания были характерны для других элементов. В частности 2-3 кратное нарастание концентрации Cd, Pb при инъекции НЧ Fe. В эксперименте установлено гепатотропное действие НЧ. Морфологические изменения ткани печени обратимого характера отмечены при введении в минимальных дозах НЧ Mo (1 мг/кг), MoО3 (1,2 мг/кг) и Zn (1,4 и 2,8 мг/кг). Выраженных структурных изменений в гепатоцитах и паренхиме при этом не отмечалось, и выявленные сдвиги (умеренное полнокровие, признаки зернистой дистрофии, гипертрофия гепатоцитов и гиперхромия их ядер и т.д.) носили адаптивный характер. Увеличение дозы НЧ сопровождалось значительными патологическими сдвигами появлением обширных участков вакуольного гепатоза и/или очагов некроза. Наблюдаемый гепатотоксический эффект при введении НЧ ZnO (1,75 и 8,9 мг/кг), в отличие от CuO и Fe, значительно снижался к концу эксперимента (21 сутки). Выявлены биотические дозировки наночастиц эссенциальных элементов, применяемых в основе препаратов-микроэлементов.

 

Публикации

1. Дерябин Д.Г., Ефремова Л.В., Васильченко А.С., Сайдакова Е.В., Сизова Е.А., Трошин П.А., Жиленков А.В., Хакина Е.Е. A zeta potential value determines the aggregate’s size of penta-substituted [60]fullerene derivatives in aqueous suspension whereas positive charge is required for toxicity against bacterial cells Journal of Nanobiotechnology, Vol. 13(50), p. 1-13 (год публикации - 2015) https://doi.org/10.1186/s12951-015-0112-6

2. Короткова А.М., Сизова Е.А., Лебедев С.В. Закономерности развития эффектов наночастиц металлов (Fe, Cu, Ni) и их оксидов (Fe3O4, CuO, NiO) в отношении растительных объектов (Triticum vulgare,Allium cepa) Сельскохозяйственная биология, - (год публикации - 2017)

3. Короткова А.М.,Сизова Е.А., Лебедев, С.В. Influence of Iron of Nanoparticles on Induction of Oxidative Damage in Triticum Vulgare Ecology, environment and conservation, Vol. 21 Nov. 2015 Suppl. Issue; Page No.(101-111) (год публикации - 2015)

4. Косян Д.Б., Русакова Е.А., Мирошников С.А., Сизова Е.А., Нотова С.В., Яушева Е.В., Короткова А.М. Comparative evaluation of the toxicity of iron and its oxides nanoparticles using Stylonchia mytilus Aquaculture, Aquarium, Conservation & Legislation International Journal of the Bioflux Society, Issue 3. Vol. 8, p. 453-460 (год публикации - 2015)

5. Косян Д.Б., Русакова Е.А., Сизова Е.А., Мирошников С.А., Скальный А.В. Impact of nanoparticles of heavy metals and their oxides on Stylonychia mytilus Ecology, environment and conservation, Vol. 21 Nov. 2015 Suppl. Issue; Page No.(113-119) (год публикации - 2015)

6. Косян Д.Б., Русакова Е.А., Сизова Е.А., Яушева Е.В., Мирошников С.А. The toxic effect and mechanisms of nanoparticles on freshwater infusoria International Journal of GEOMATE, Vol. 11, Issue 23, pp. 2170-2176 (год публикации - 2016)

7. Лебедев С.В., Яушева Е.В., Галактионова Л.В., Сизова Е.А. Impact of Zn Nanoparticles on Growth, Survival and Activity of Antioxidant Enzymes in Eisenia fetida Modern Applied Science, No 10, Vol. 9, p. 34-44 (год публикации - 2015) https://doi.org/10.5539/mas.v9n10p34

8. Мирошникова Е.П., Аринжанов А.Е., Килякова Ю.В., Сизова Е.А., Мирошников С.А. Antagonist metal alloy nanoparticles of iron and cobalt: impact on trace element metabolism in carp and chicken Human & Veterinary Medicine OPEN ACCESS International Journal of the Bioflux Society, Issue 4, Vol. 7, p. 253-259 (год публикации - 2015)

9. Русакова Е.А., Косян Д.Б., Сизова Е.А., Мирошников С.А., Сипайлова О.Ю. Comparative evaluation of acute toxicity of nanoparticles of zinc, copper and their nanosystems using Stylonychia mytilus Oriental Journal of Chemistry, Vol. 31 (Spl Edn), Pg. 105-112 (год публикации - 2015) https://doi.org/10.13005/ojc/31.Special-Issue1.13

10. Сизова Е.А., Мирошников С.А., Яушева Е.В., Косян Д.Б. Comparative characteristic of toxicity of nanoparticles using the test of bacterial bioluminescence OSPC - Biosciences, Biotechnology Research Asia, Vol.12 (Spl. End. 2), p. 361-368 (год публикации - 2015) https://doi.org/10.13005/bbra/2047

11. Яушева Е.В., Лебедев С.В., Сизова Е.А., Гавриш И.А. Влияние наночастиц Al2O3 на антиоксидантный статус E.foetida и микробиоценоз почвы Сельскохозяйственная биология, - (год публикации - 2017)

12. Яушева Е.В., Сизова Е.А., Мирошников С.А. Evaluation of Biogenic Characteristics of Iron Nanoparticles and Its Alloys in Vitro Modern Applied Science, No 10, Vol. 9, p. 65-71 (год публикации - 2015) https://doi.org/10.5539/mas.v9n10p65

13. Короткова А.М., Сизова Е.А. ИК-спектроскопия экстрактов пшеницы при экспозиции наночастицами металлов Биология – наука ХХI века. Сб. тезисов по мат. 19-ой Междунар. Пущинской школы-конференции молодых ученых, Т. 3, С. 395-396 (год публикации - 2015)

14. Мирошникова Е.П., Сизова Е.А. Адаптационные изменения обмена химических элементов при использовании препарата наночастиц сплава железа и кобальта Материалы XVI Всероссийского симпозиума «Эколого – физиологические проблемы адаптации», с. 120-121 (год публикации - 2015)

15. Сизова Е.А., Мирошников С.А., Мирошникова Е.П., Килякова Ю.В., Аринжанов А.Е. Toxicity assessment of metal oxide nanoparticles of mixed valence in conditions of aquatic biocenosis Trace elements between deficiency and toxicity: update and perspectives, p. 41 (год публикации - 2015)

16. Яушева Е.В., Сизова Е.А., Лебедев С.В., Скальный А.В., Плотников А.О., Хлопко Ю.А., Мирошников С.А. Влияние наночастиц цинка на состав и разнообразие микрофлоры кишечника калифорнийских червей Eisenia fetida Andrei Bouche VIII Российская научная конференция с международным участием «Персистенция и симбиоз микроорганизмов», - (год публикации - 2015)


Аннотация результатов, полученных в 2016 году
В 2016 году выполнено более 350 экспериментов с использованием в качестве объектов: растений сельскохозяйственных культур (Triticuma estivum L. и др.); Eisenia foetida; искусственных аквабиоценозов (одноклеточные зеленые водоросли- S.quadricauda, Сhl. Vulgaris; ряска малая - Lemna minor L., элодея - Elodea Canadensis Rich; инфузории - Paramecium candatum Ehr.; рачки - Daphnia magna Straus; моллюски - Limnea stagnalis и рыб - Danio rerio); почвенных биоценозов; цыплят-бройлеров. По итогам работ подготовлено 1 монография, 14 публикаций в периодические издания Scopus и Web of Science, из которых 7 статей опубликовано, 4 приняты к публикации, 3 находятся на рецензии. Подготовлены информационные ресурсы в сети Интернет посвященные проекту www.agroecology56.ru. В ходе исследований сформированы базы данных, включающие результаты исследований по оценки состава микробных биоценозов методом метагеномного секвенирования воды, кишечника и жабр (Danio Rerio), кишечника прудовика обыкновенного (Limnea stagnalis) и др. Характерной особенностью действия наночастиц (НЧ) СеО2, МоО, Ni, NiO и SiO2 на биоценоз кишечника рыб Danio rerio являлось снижение численности грамотрицательных микроорганизмов (Proteobacteria) и увеличение грамположительной микрофлоры с повышением числа представителей классов Actinobacteria и Bacilli. Анализ микробиоценоза жабр рыб выявил тенденцию снижения числа бактерий таксона Proteobacteria и повышению числа бактерий таксонов Firmicutes и Actinobacteria при поступлении НЧ СеО2, Ni, NiO и SiO2. На уровне класса в результате введения НЧ СеО2, МоО3, Ni, NiO и SiO2 отмечалось увеличение численности бактерий относящихся к Bacilli и Gammaproteobacteria. Основными родами которые были выявлены в данных классах являлись р. Bacillus (B. butanolivorans), р. Acinetobacter (A. baumannii, A.gerneri). Внесение НЧ МоО3 характеризовалось увеличением микроорганизмов р. Kocuria (K. assamensis, K. palustris). Оценка микробиоценозов кишечника прудовика обыкновенного (Limnea stagnalis) на фоне внесения НЧ СеО2, МоО3, Ni, NiO и SiO2 выявила факт роста видового разнообразия. Более половины выявленных микроорганизмов занимали грамотрицательные бактерии относящиеся к таксону Proteobacteria. В отдельных случаях многочисленными группами являлись Firmicutes (НЧ СеО2, МоО3, Ni, NiO, SiO2), Actinobacteria (НЧ СеО2, SiO2), Bacteroidetes (НЧ МоО3, NiO). В ходе исследования было установлено, что основным классом, представляющим микробное разнообразие кишечника прудовика являлись Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Betaproteobacteria (только при введении НЧ МоО3) и Flavobacteriia (только при введении НЧ NiO) к которым относилось более 50 % всех выявленных бактерий. В ходе исследований сформированы базы данных, включающие результаты исследований по оценке действия техногенных наноматериалов на биоценозы почвенных организмов. Наиболее чувствительными к действию техногенных наноматериалов оказались грибы и аммонификаторы, менее чувствительны микроорганизмы, использующие минеральные формы азота. Выявлена связь между изменениями в микроэкологическом статусе кишечника червя и почвы. Однако, микроорганизмы кишечника червя были более чувствительны по отношению к вносимым НЧ, что проявлялось в большем снижении их численности. Оценка миграции элементов, поступающих в систему «почва - E. foetida» позволила установить, что при поступлении НЧ Zn, миграция цинка из почвы в организм E. foetida составляла 0,52; 0,58; 059; 0,91; 1,12 мг/кг/сут., для числового ряда дозировок НЧ 0; 100,0; 200,0; 500,0. В ходе исследований сформированы базы данных, включающие результаты исследований по оценке влияния НЧ Fe, SiO2, Ni, NiO, Mo и MoO3 на витальные показатели Triticum аestivum L. Выявлено стимулирование процессов прорастания семян НЧ Fe и SiO2 при концентрации в почве 50 мг/кг. Особенностью поведения нанодисперстных материалов в почве является их агрегация и снижение токсичности при увеличении концентрации. Зависимость фитотоксичности НЧ от концентрации Ni, NiO, MоO3 и SiO2 описана линейной зависимостью «доза-эффект», для НЧ Mo и Fe характерна U - образная зависимость. Микробиоценозы почв характеризовались увеличением численности бактерий аммонификаторов и амилолитиков при внесении в почву НЧ Fe, Ni и Mo в концентрации до 50 мг/кг. Присутствие в почве НЧ SiO2, NiO и MoO3 сопровождалось увеличением численности микроорганизмов этих групп с максимальными значениями для НЧ NiO и MoO3 (100 мг/кг), а для НЧ SiO2 – (250-1000 мг/кг). Олиготрофные микроорганизмы проявили высокую чувствительность к внесению в среду НЧ Ni, NiO, MoO3, SiO2. В вариантах с использованием НЧ Fe и Mo в диапазоне концентраций от 250 до 1000 мг/кг наблюдалось стимулирование численности бактерий этой группы. Стимулирование роста целлюлозолитических микроорганизмов отмечено при увеличении концентрации НЧ Fe в диапазоне от 0 до 250 мг/кг, с максимальным превышением контрольного варианта на 32,7% в варианте опыта Fe250. При увеличении концентрации НЧ Fe свыше 250 мг/кг и внесении НЧ SiO2, Ni, NiO, Mo и MoO3 во всем диапазоне концентраций отмечалось снижение численности микроорганизмов на 70% и более. Численность грибов достоверно снижается при внесении в почву НЧ Fe, Mо, MoO3 и NiO. В вариантах опыта Ni100 и SiO2 100-500 наблюдается стимулирование грибной микрофлоры. Внесение в почву НЧ никеля стимулирует развитие бактерий рода Azotobacter до 90 и 96,6% в вариантах опыта Ni250 и NiO250 соответственно. В ходе исследований сформированы базы данных, включающие результаты исследований по оценке действия ультрадисперстных препаратов – микроэлементов на переваримость, конверсию корма, продуктивность цыплят-бройлеров. В эксперименте показана более высокая биодоступность микроэлементов из препаратов наночастиц в сравнении с органическими и минеральными формами металлов-микроэлементов. Включение в рацион цыплят-бройлеров микроэлементов в наноформе ( сплавы Fe-Co и Сu-Zn) сопровождалось увеличением интенсивности роста цыплят и повышением конверсии корма. Присутствие кобальта в составе препарата наночастиц стало дополнительным фактором активизации белкового обмена. Отмечалось увеличение переваримости питательных веществ на фоне поступления отдельных ультрадисперсных веществ с кормом. корма. В ходе исследований сформированы базы данных, включающие результаты исследований по оценке микробиоценозов полостного и пристеночного содержимого кишечника цыплят-бройлеров на фоне скармливания препарата НЧ Fe, Cu, Zn, сплава Cu-Zn и органических форм этих металлов. Разработан метод повышения плодородия почв, реализуемый через внесение в почву наночастиц железа и оксида кремния в весовом соотношении 1:1, концентрацией в рабочей жидкости 5×10-5 - 10×10-5 г/л. В ходе исследований разработан способ нивелирования антагонистических взаимоотношений эссенциальных элементов на этапе всасывания в пищеварительном тракте животных. Способ апробирован для моделей НЧ сплавов Fe-Co и Cu-Zn.

 

Публикации

1. C. В. Лебедев, Е. А. Сизова, И. А. Гавриш Трофометаболический потенциал Eisenia fetida, обусловленный присутствием в среде наночастиц меди и её оксида Поволжский экологический журнал, - (год публикации - 2017)

2. В.А. Багиров, Е.П. Мирошникова, Е.А. Сизова, И.А. Гавриш Влияние никельсодержащих наночастиц на таксономическое разнообразие микрофлоры кишечника и состояние антиоксидантной системы Danio Rerio Биология внутренних вод, - (год публикации - 2017)

3. Е.А. РУСАКОВА, Е.А. СИЗОВА, С.А. МИРОШНИКОВ, О.Ю. СИПАЙЛОВА, Ш.А. МАКАЕВ Гепатотоксические, гематологические изменения и элементный статус у беременных крыс линии wistar при действии наночастиц Zn и ZnO СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ БИОЛОГИЯ, том 51, № 4, с. 524-532 (год публикации - 2016) https://doi.org/10.15389/agrobiology.2016.4.524rus

4. Е.А. СИЗОВА, Е.П. МИРОШНИКОВА, В.Л. КОРОЛЕВ, Ш.А. МАКАЕВ, В.А. ШАХОВ МОРФО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ У БРОЙЛЕРОВ ПРИ КОРРЕКЦИИ РАЦИОНА СОЛЯМИ И НАНОЧАСТИЦАМИ Cu СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ БИОЛОГИЯ, том 51, №6, стр. 903-911 (год публикации - 2016) https://doi.org/10.15389/agrobiology.2016.6.903eng / 10.15389/agrobiology.2016.6.903rus

5. Е.А. СИЗОВА, С.А. МИРОШНИКОВ, В.В. КАЛАШНИКОВ ЦИТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ У КРЫС ЛИНИИ Wistar ПОД ВЛИЯНИЕМ МОЛИБДЕНСОДЕРЖАЩИХ НАНОЧАСТИЦ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ БИОЛОГИЯ, том 51, № 6, с. 929-936 (год публикации - 2016) https://doi.org/10.15389/agrobiology.2016.6.///rus

6. Е.А. СИЗОВА, С.А. МИРОШНИКОВ, С.В. ЛЕБЕДЕВ, А.В. КУДАШЕВА, Н.И. РЯБОВ О ПЕРСПЕКТИВНОСТИ НАНОПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ СПЛАВОВ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ-АНТАГОНИСТОВ (на примере Fe и Co) СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ БИОЛОГИЯ, том 51, № 4, с. 553-562 (год публикации - 2016) https://doi.org/10.15389/agrobiology.2016.4.553rus

7. Е.П. МИРОШНИКОВА, Д.Б. КОСЯН, А.Е. АРИНЖАНОВ, Е.А. СИЗОВА О ТОКСИЧНОСТИ И ПРООКСИДАНТНОМ ЭФФЕКТЕ НАНОЧАСТИЦ CeO2 и SiO2 (НА МОДЕЛИ Danio rerio) СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ БИОЛОГИЯ, том 51, № 6, с. 921-928 (год публикации - 2016) https://doi.org/10.15389/agrobiology.2016.6.///rus

8. И.Ф. Каримов, Е.А. Сизова, Ю.А. Хлопко, А.О. Плотников, Е.А. Герасимова Метагеномный анализ разнообразия прокариот искусственного аквабиоценоза Биология внутренних вод, - (год публикации - 2017)

9. Лебедев С.В., Яушева Е.В., Галактионова Л.В., Сизова Е.А. Impact of molybdenum nanoparticles on survival, activity of enzymes, and chemical elements in Eisenia fetida using test on artificial substrata Environmental Science and Pollution Research, Volume 23, Issue 18, pp 18099–18110 (год публикации - 2016) https://doi.org/10.1007/s11356-016-6916-6

10. Сипайлова О.Ю., Корнеева Г.И., Мирошников С.А., Сизова Е.А., Русакова Е.А Гепатотоксический эффект наночастиц оксидов металлов (ZnО и CuO) Морфология, - (год публикации - 2017)

11. Яушева Е.В., Сизова Е.А., Лебедев С.В., Скальный А.В., Мирошников С.А., Плотников А.О., Хлопко Ю., Гоголева Н., Черкасов С. Influence of zinc nanoparticles on survival of worms Eisenia fetida and taxonomic diversity of the gut microflora Environmental Science and Pollution Research, Volume 23 Number 13, 13245-13254 (год публикации - 2016) https://doi.org/10.1007/s11356-016-6474-y

12. Сизова Е.А., Нотова С.В., Лебедев С.А., Дерябина Т.Д., Короткова А.М., Мирошников И.С., Яушева Е.В., Мирошникова Е.П. Гавриш И.А. Техногенные наноматериалы в агробиоценозах: перспективы и риски ООО "ИПК" Университет", Оренбург, - (год публикации - 2016)

13. Мирошникова Е.П., Сизова Е.А., Мирошников И.С. ПРООКСИДАНТНЫЕ ЭФФЕКТЫ НАНОЧАСТИЦ ОСИДОВ МЕТАЛЛОВ ПЕРЕМЕННОЙ ВАЛЕНТНОСТИ В ОТНОШЕНИИ ПРЕСНОВОДНЫХ ГИДРОБИОНТОВ Актуальная биотехнология, №3 (18) (год публикации - 2016)

14. Сизова Е.А., Мирошников С.А. Биоэкологическая оценка различных тест-объектов при контакте с металлами в наноформе Актуальная биотехнология, №3 (18) (год публикации - 2016)

15. Галактионова Л.В., Лебедев С.В., Гавриш И.А., Сальникова Е.В., Осипова Е.А., Сизова Е.А. Способ повышения плодородия почв -, - (год публикации - )

16. Галактионова Л.В., Лебедев С.В., Гавриш И.А., Сальникова Е.В., Осипова Е.А., Сизова Е.А. Средство стимулирования роста сельскохозяйственных культур, преимущественно пшеницы -, - (год публикации - )

17. Мирошников С.А., Лебедев С.В., Яушева Е.В., Сизова Е.А. Корм для сельскохозяйственной птицы -, №2577907, Бюл.№8 (год публикации - )

18. Мирошников С.А., Лебедев С.В., Яушева Е.В., Сизова Е.А. Способ повышения продуктивности цыплят-бройлеров -, - (год публикации - )

19. Мирошников С.А., Сизова Е.А., Дерябин Д.Г., Дерябина Т.Д., Рогачев Б.Г. Способ предпосевной обработки семян. -, №2582499, Бюл.№12 (год публикации - )

20. Мирошников С.А., Сизова Е.А., Карамаев С.В., Соболева Н.В., Докина Н.Н., Кизаев М.А., Фролов Д.В., Рогачев Б.Г., Павлов Л.Н. Способ предпосевной обработки семян козлятника восточного с использованием наночастиц Fe -, - (год публикации - )

21. Мирошников С.А., Сизова Е.А., Сидоров Ю.Н., Рогачев Б.Г., Павлов Л.Н. Устройство для выращивания вермикультуры технологически специализированного дождевого червя Eisenia foetida и получения биогумуса -, №2595738, Бюл.№24 (год публикации - )

22. Мирошников С.А., Сизова Е.А., Холодилина Т.Н., Дерябина Т.Д., Докина Н.Н., Рогачев Б.Г., Павлов Л.Н. Способ выращивания зеленных гидропонных кормов с использованием наноматериалов -, №2015145502 (год публикации - )

23. - Уникальная лаборатория агроэкологии техногенных наноматериалов появилась в Оренбургской области Вести 24, 18 октября, 15:10 (год публикации - )

24. - ОРЕНБУРГСКИЕ УЧЕНЫЕ ИЗОБРЕЛИ ТАБЛЕТКИ РОСТА ДЛЯ ДОМАШНЕЙ ПТИЦЫ Вести Оренбуржья, 05 сентября, 12:09 (год публикации - )


Возможность практического использования результатов
не указано